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淺說實時熒光定量PCR儀的關鍵的作用

更新時間:2013-07-08      點擊次數:2197
    在90年代早期,就已經發現實時熒光定量PCR儀,但是當時的技術比較落后,給后來的PCR儀起到了的兩個關鍵的作用是:
1、實時熒光定量PCR儀的核酸外切酶活性的發現,能降解特異性熒光記探針,因此使得間接的檢測PCR產物成為可能。
2、實時熒光定量PCR儀使在一密閉的反應管中能實時地監測反應全過程。這兩個發現的結合以及相應的儀器和試劑的商品化發展的導致在研究工作中的運用。
  現在,PCR儀隨著反應循環數的增加,zui終PCR反應不再以指數方式生成模板,從而進入平臺期。因此可以在PCR反應處于指數期的某一點 上來檢測PCR產物的量,并且由此來推斷模板zui初的含量。每個反應管內的熒光信號達到設定的域值時所經歷的循環數。研究表明,每個模板的域值循環數值與該模板的起始拷貝數的 對數存在線性關系,起始拷貝數越多,域值循環數值越小。

 

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